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磁珠分选细胞时需注意哪些事项
2019-04-17

免疫磁珠细胞分选产品可简单快速分离细胞DNA,分离的DNA纯度高,回收率好,温和保留了细胞的原特性,可直接用于下游的实验。爱测智能科技提醒,在做磁珠分选细胞时需注意以下事项:

  损伤模型、模型复制、活体成像、缺血再灌注、行为学检查、原位癌模型、双荧光素酶、基因甲基化、免疫组化

  1、待分选细胞中如有贴壁细胞,建议在分选前先贴壁培养去除,或者提高EDTA浓度。  

  2、抗体包被磁珠对死细胞常有非特异性结合。因而分选前去除死细胞。 

  3、新鲜分离骨髓细胞,先用胶原酶、DNA酶、胰酶联合消化,可使细胞团块解聚,从而提高分离效率。   

  4、上分离柱前,充分振荡,混悬细胞,打散细胞团块。  

  5、用分离柱分选,应用真空抽滤水,减少水中气泡,使分离柱不被气泡阻滞。 

  6、细胞悬液加入分离柱中时,应将滴管伸至底壁后加入,避免将细悬液沿管壁流入,使管壁残流末分选细胞,以致后继洗柱过程中,因疏忽末被洗下,最后导致纯度不高。洗柱时,应在前次液体充分流尽后,再加洗液。  

  7、分选细胞量应根据说明书控制,不超量。  

  8、孵育时间和温度应按说明书进行,延长孵育时间、提高温度会增加非特异结合。  

  9、先用抗体阻断Fc受体,可降低非特异性结合。