细胞培养在科研领域里面算是成本费用比较高的一项,很多客户问我们,为什么我们把细胞产品发货到他们手上的时候,细胞长势以及传代能力很好;而客户自己培养一段时间后,细胞长势就不行了甚至死亡?细胞培养不容马虎大意,在此爱测智能科技小编介绍下正确的细胞培养无菌操作的步骤:
1. 实验进行前,无菌室及无菌操作台以紫外灯照射30-60分钟灭菌,以70%酒精擦拭无菌操作台面,并开启无菌操作台风扇运转10分钟后,才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株,且即使培养基相同亦不共享培养基,以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70%酒精擦拭无菌操作台面。操作间隔应让无菌操作台运转10分钟以上后,再进行下一个细胞株的操作。
2. 无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如试管架、吸管、吸取器或吸管盒等可以暂时放置,其它实验用品用完即应移出,以利于气流之流通。实验用品以70%酒精擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在台面的中央无菌区域,勿在边缘的非无菌区域操作。
3. 小心取用无菌的实验物品,避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或容器瓶口,亦不要在打开的容器正上方操作实验。容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45°角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。
4. 工作人员应注意自身的安全,须穿戴实验衣及手套后才进行实验。对于来自人类或是病毒感染的细胞株应特别小心操作,并选择适当等级的无菌操作台。操作过程中,应避免引起aerosol的产生,小心毒性药品,例如DMSO及TPA 等,并避免尖锐针头的伤害等。
5. 另外还需定期检测CO2钢瓶的CO2压力。
6. 水槽可添加消毒剂,定期更换水槽的水。
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